在干扰存在时,方法的选择性或特异性是进行方法确认的必要手段。
特异性通常被认为是高度专一性100%的无干扰,但实际上干扰很难不存在,仅仅是因为我们对干扰的预测和认识程度的限制所至,实际检测中我们往往会遇到各种包括迄今为止尚不知道的干扰,如果干扰物质既不能从被分析物中分离出来,或者又不能被我们所认识的话,那么干扰就会产生一定的影响。根据方法原理或特性进行方法选择性或特异性确认。分为两种情况
当干扰物未知时
(1)在定性检测中,通过标记物或阳性质控和阴性对照的方法进行确认。
(2)在定量检测中,如果从被分析物的信号中出现弯曲现象,从而可能导致标准曲线的变化,影响了曲线的相关性,潜在的原因可能是有干扰物质存在(对曲线本身是非线性的情形,可能无效)。此时应该对方法进行扩充。
(3)在定量初筛检测中(如GC、LC、ELISA、CHARMⅡ等),产生的阳性信号(阳性结果)或许被认为就是被分析物的信号。但是这个信号的产生到底是由于被分析物的存在,还是同时存在其他共存的干扰物质就难于确定。此时应该通过其他方法,如红外、质谱等有效方法进行确认,证明被分析物或干扰物的存在。
当干扰物已知时
对包含多种可疑干扰物质的样本进行检测分析,检验干扰物质的影响,干扰物质的存在是否会提高或者抑制被分析物的检测和量化。如会提高或者抑制,则需对方法进行扩充。
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